Beschreibung:
Der Protein Marker besteht aus 10 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Die 40 kb und 90 kb Bande ist zur besseren Orientierung mit einem 2. Farbstoff eingefärbt.
Anwendung:
- Überwachung von Proteinmigration während SDS-Gelelektrophorese
- Überwachung von Proteintransfer auf Membranen während Western
Blots
- Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen
Auftrag: SDS-Gel
- Marker bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 °C kurz erwärmen und vortexen. NICHT KOCHEN!
- Die gewünschte Menge Marker entnehmen und in ein neues Schraubdeckelgefäß überführen. Marker direkt auf das Gel laden.
- Marker bei – 20°C lagern und vor der weiteren Verwendung bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 ° C erwärmen.
Nach der Elektrophorese Proteine im Gel durch Coomassie-Färbung sichtbar machen oder im
Western Blot detektieren.
Der Marker sollte vor seiner ersten Verwendung aliquotiert werden, um Kontaminationen der Stocklösung zu vermeiden.
Ladevolumen
Minigel: 10 µl (0,75 mm), 5 μl/Blot
Standardgel: 20 µl (0,75 mm); 10 μl/Blot
Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden.
Transport: Mit Kühlakkus
Lagerung: bei -20°C
Hinweis:
Die Protein-Leiter ist optimal für Auftrennungen in 4 – 20 %-igen SDS-PAGE-Gelen geeignet.
Bei Auftrennungen in 8 bis 10 %igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen.
Kovalent gebundene Farbstoffe beeinflussen das Laufverhalten von Proteinen. Der Protein-Marker ist deshalb nur für ungefähre Molekulargewichtsbestimmungen geeignet. Jedes Lot des Markers wird gegen einen ungefärbten Standard getestet.
Der Protein Marker besteht aus 10 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden.
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