Features:
Maximo Taq-Blue DNA Polymerase garantiert ein gutes PCR-Ergebnis für viele PCR-Standardanwendungen und verschiedenste Templates.
Die Polymerase wird zusammen in einem Farbstoff geliefert. Der Farbstoff erpsart einen separaten Ladepuffer, weshalb das PCR Amplifikat direkt nach der PCR auf das Agarosegel geladen werden
kann.
Anwendung:
- Standard-PCR
- High-throughput PCR
- Primer Extension
- Gene mutation
- T/A Klonierung
Beschreibung:
Maximo Tag-Blue DNA Polymeraseist ein temperaturstabiles Enzym mit einem Molekulargewicht von ca. 94kDa, aus dem Eubakterium Thermus aquaticus. Das
unmodifizierte Enzym erreicht seine höchste Prozessivität bei 72°C. Es katalysiert die Polymerisierung von Nukleotiden in Duplex-DNA in der 5´→3´-Richtung in Anwesenheit von Magnesiumionen. Die
Polymerase wird ready-to-load mit Farbstoff/Ladepuffer geliefert.
Konzentration: 1 u/µl
Einheitenbestimmung:
Ein Unit ist die Enrymmenge, die benötigt wird, um 10 nmol dNTP in 30 min. bei 74°C in säureunlösliche Substanz zu überführen.
Lagerbuffer:
25mM Tris-HCl (pH8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% Glycerol, 0.5% NP 40, 0.5% Tween 20,
Farbstoff/Ladepuffer
Mitgelieferte Reaktionsbuffer:
10X Buffer I: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl, pH 9.0, 1% Triton X-100, 15mM MgCl2
MgCl2: 100 mM
Transport: Mit Kühlakkus
Lagerung: bei -20°C für mind. 12 Monate
Quality control:
- PCR Tests mit Lambda DNA (4kb), humaner Plazenta
DNA 2,5 KB
- Abwesenheit von Endo- und Exonukleasen
- Kontrolle auf Chargenabweisungen und Verunreinigung mit
DNA
Anwendung:
Komponenten | Volume pro Reaktion |
10X reaction buffer I |
5 µl |
100 mM MgCl2 | optional |
dNTP-Mix (40mM) | 1.0 µl |
Up-stream primer (10 µM stock) | 0,5-2.5 µl |
Down-stream primer (10µM stock) | 0.5-2,5 µl |
Template DNA |
0.1-15 ng/ml Plasmid |
Maximo Taq DNA-Blue Polymerase (1 u/µl) | 1,5 µl - 2,5 µl |
Steriles dest. Wasser (PCR-Grade) |
bis 50 µl Reaktionsvolumen |
Hinweis:
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen
- Reaktionsgemisch auf Eis ansetzen
- Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen
- Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl2 zu optimieren
Standardprotokoll
Schritt | Zeit | Temperatur |
Erste Denaturierung |
2-5 min |
94-95°C |
|
10-25 sec |
94-95°C |
Schluss-Extension | 5 min | 72°C |
Final price excl. shipping costs3
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