Maximo DFS-PLUS Taq DNA Polymerase (DNA-frei)

Features:
Durch die Optimierung der bewährten DFS-Taq DNA Polymerase mit neuen Reaktionspuffer und speziellen Additiven entstand eine Polymerase, die nicht nur frei von bakterieller DNA ist, sondern auch sehr robust gegenüber PCR-Inhibitoren reagiert (Biomolekülen wie Polysacchariden, Fette und Proteine). Gesteigerte Performance des Enzyms sichert überlegene Sensitivität und zuverlässige Amplifikation. 

Beschreibung:
Die Polymerase repliziert DNA bei 72°C. Sie katalysiert die Polymerisation von Nukleotiden zu Doppelstrang-DNA in 5´-->3´ Richtung und besitzt 5´-->3´ Exonuklease-Aktivität.

Anwendungsbereich:
Anstelle von konventionell gereinigter Taq-DNA-Polymerase für sensitive PCR Untersuchungen, Nachweise von Bakterien-DNA oder wenn Biomoleküle die PCR inhibieren.

Konzentration:
5 units/μl gelöst in 10 mM KPO₄ (pH 7.4 bei 25 °C), 0.1 mM EDTA, 0.1%, Tween 20, 0.1 % Triton X-100 und 50 % (v/v) Glycerin.

Unitdefinition:
Ein Unit ist die Enzymmenge, die bei 74°C in 30 min 10 nmol Desoxyribonukleotide in TCA-fällbares, säureunlösliches Material umwandelt

Endonukleasen:
- Eine Inkubation von 20 Units des Enzyms in 50 μl 1x 

  Reaktionspuffer mit 1 μg LambdaDNA für 16 h bei 65 °C

  ergibt keinen nachweisbaren DNA-Abbau.
- Eine Inkubation von 20 Units des Enzyms in 50 μl 1x

  Reaktionspuffer mit 1 μg Lambda EcoR I/Hind III-
  Fragmenten für 16 h bei 65°C führt zu keinem

  nachweisbaren Abbau der DNA.
- Eine Inkubation von 32 Units des Enzyms in 50 μl 1x

  Reaktionspuffer mit 1 μg supercoiled pUC18 DNA für 
  16 h bei 70°C resultiert in keiner Entwindung der DNA.

Priming-Aktivität:

- Eine Inkubation von 40 Units des Enzyms in 100 μl 1x

  Reaktionspuffer mit 100 ng Template-DNA und je
  0.2 mM dNTPs führt ohne Primer zu keiner DNA-Synthese.

PCR-Test:
- Gute DNA-Amplifikationen wurden bei Verwendung von

  Lambda-DNA (amplifiziertes Fragment 12 kb) und humaner

  Plazenta-DNA (amplifiziertes Fragment 3.0 kb) als

 Templates erreicht.

DNA-Gehalt
- Frei von Kontaminationen mit enterobakterieller DNA.

Reaktionspuffer:
DFS-Plus Taq DNA Polymerase wird mit zwei Ammoniumsulfat Puffern und MgCl₂ (100mM) geliefert.

Lagerung:
Um das Wachstum von Bakterien zu verhindern, die während der Verwendung in die Lösungen eingebracht werden können, wird eine Lagerung bei –20 °C empfohlen.

Transport: Mit Kühlakkus

Hinweis: 
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen
- Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur ansetzen
- Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen
- Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl₂ zu optimieren

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