Beschreibung:
Der Protein Marker besteht aus 11 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Die 10,5 kb, 42 kb und 95 kb Bande ist zur besseren Orientierung mit einem 2. Farbstoff eingefärbt.
Anwendung:
- Überwachung von Proteinmigration während SDS-
Gelelektrophorese
- Überwachung von Proteintransfer auf Membranen während
Western Blots
- Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen
11 Banden: 10.5, 14, 22, 29, 42, 51, 62, 70, 95, 130, 175 kDa
Auftrag: SDS-Gel
- Die Proteinleiter bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 °C
kurz erwärmen und vortexen. NICHT KOCHEN!
- Die gewünschte Menge Marker entnehmen und in ein neues
Schraubdeckelgefäß überführen.
- Marker bei – 20°C lagern und vor der weiteren Verwendung
bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 ° C erwärmen.
Der Marker sollte vor seiner ersten Verwendung aliquotiert werden, um Kontaminationen der Stocklösung zu vermeiden.
Ladevolumen Proteinleiter
Minigel: 5 µl (0,75 mm), 2,5 μl/Blot
Standardgel: 10 µl (0,75 mm); 5 μl/Blot
Transport: Mit Kühlakkus
Lagerung: bei -20°C
Hinweis:
Protein-Marker ist optimal für Auftrennungen in 12 %igen SDS-PAGE-Gelen (37.5:1 Acrylamid:Bisacrylamid) geeignet.
Bei Auftrennungen in 8- bis 15%igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen, während sie bei 12- bis 15 %igen Gelen und Gradientengelen einzeln sichtbar sind.
Der Marker wurde für die Färbung mit Coomassie Brilliant Blue R-250 optimiert, kann jedoch auch mit anderen Färbemethoden (z.B. Silber-Färbung) sichtbar gemacht werden. Da diese Methode 10- bis 100fach sensitiver ist als die Coomassie-Färbung, sollte die Menge an aufgetragenem Marker reduziert werden.
Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden.
Der Protein Marker besteht aus 11 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden.
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Protein Leiter PS 11 (11 - 175 kDa)