Der Protein Marker besteht aus 10 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden. Die exakt definierten Banden können nach der Elektrophorese mit Coomassie Brilliant Blue R-250 sichtbar gemacht werden. Die 30 kb, 52 kb und 270 kb Bande ist zur besseren Orientierung mit einem rotem, bzw. grünen Farbstoff eingefärbt.
Anwendung:
- Überwachung von Proteinmigration während SDS-Gelelektrophorese
- Überwachung von Proteintransfer auf Membranen während Western
Blots
- Größenbestimmung von Proteinen auf SDS-Polyacrylamidgelen
10 Banden: 6,5, 16, 30, 37, 52, 66, 48, 95, 130, 175, 275 kDa
Transport: Mit Kühlakkus
Lagerung: bei -20°C
- Marker bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 °C kurz
erwärmen und vortexen.
NICHT KOCHEN!
- Die gewünschte Menge Marker entnehmen und in ein neues
Schraubdeckelgefäß überführen.
- Marker bei – 20°C lagern und vor der weiteren Verwendung
bei Raumtemperatur auftauen oder bei 37 – 40 ° C erwärmen.
Der Marker sollte vor seiner ersten Verwendung aliquotiert werden, um Kontaminationen der Stocklösung zu vermeiden.
Ladevolumen
Minigel: 5 µl (0,75 mm), 2,5 μl/Blot
Standardgel: 10 µl (0,75 mm); 5 μl/Blot
Hinweis:
Protein-Marker ist optimal für Auftrennungen in 12 %igen SDS-PAGE-Gelen (37.5:1 Acrylamid:Bisacrylamid) geeignet.
Bei Auftrennungen in 8- bis 15%igen Gelen können die unteren Markerbanden mit der Farbstofffront laufen, während sie bei 12- bis 15 %igen Gelen und Gradientengelen einzeln sichtbar sind.
Der Marker wurde für die Färbung mit Coomassie Brilliant Blue R-250 optimiert, kann jedoch auch mit anderen Färbemethoden (z.B. Silber-Färbung) sichtbar gemacht werden. Da diese Methode 10- bis 100fach sensitiver ist als die Coomassie-Färbung, sollte die Menge an aufgetragenem Marker reduziert werden.
Da der Marker 2 % SDS enthält, sollte er für die Molekulargewichtsbestimmung auf nativen Polyacrylamidgelen nicht verwendet werden.
Der Protein Marker besteht aus 10 hochaufgereinigten Proteinen. Er kann direkt auf ein SDS Gel aufgetragen werden.
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